Հոդվածներ

ԴՆԹ-ի վերականգնողական տեխնոլոգիա


ԴՆԹ-ի յուրաքանչյուր հատված, որը մաքրվել և առանձնացվել է մնացած գենետիկ նյութից, պարունակում է մեկ կամ մի քանի գեն:

Հիշեք դա յուրաքանչյուր գեն սպիտակուց է առաջացնումՈւստի ուսումնասիրելով գենը, մենք ուսումնասիրում ենք այն կոդավորված սպիտակուցը:

Բայց ի՞նչ պետք է անենք գենը ուսումնասիրելու համար:

Մենք պետք է այն ներդնենք հյուրընկալողի գենետիկական նյութում (ԴՆԹ), որպեսզի տեղի ունենա mRNA գենի տառադարձման և սպիտակուցի թարգմանության համար:

The հյուրընկալող Այն արագ բազմացող (վերարտադրող) օրգանիզմ է, ինչպիսիք են մանրէները: Երբ մանրէները վերարտադրվում են երկբաշխման միջոցով, նրանք իրենց գենետիկ նյութը փոխանցում են իրենց «երեխաներին», այնպես որ, եթե այս նյութը պարունակում է ուսումնասիրության ԴՆԹ բեկոր, մենք շուտով կունենանք միլիոնավոր մանրեներ գեների հետ:

The պլազմիդ Դա շրջանաձև գենետիկական նյութն է, որը պարտադիր չէ քրոմոսոմի հետ, որը տարածվում է բակտերիաների հիալոպլազմով: Այն անցնում է նույն պրոցեսը, ինչպիսին է քրոմոսոմային ԴՆԹ-ի մակագրումը և թարգմանությունը, և բազմապատկվում բջջային յուրաքանչյուր բաժանման հետ ՝ պատճենը փոխանցելով յուրաքանչյուր «դստեր» խցին:

Պլազմիդը հանվում է մանրէային բջիջներից, որպեսզի ուսումնասիրության գենը տեղադրվի և այն փոխարինվի մանրէների մեջ:

Ավելի լավ հասկանալու համար, եկեք քայլ առ քայլ իմանանք այս գործընթացը (հետևեք նկարում).

  1. Հետազոտողները ցանկանում են ուսումնասիրել մարդու գենը, որը արտադրում է սպիտակուց, որը հայտնի չէ գործելու համար:
  2. Հետազոտողները «կտրում են» (սահմանափակման ֆերմենտներ օգտագործելով) մարդու ԴՆԹ-ից `հետաքրքրության գենը:
  3. Այս գենը պարունակող ԴՆԹ – ի հատվածը բազմապատկվում է PCR– ով ՝ նույն բեկորի (կամ նույն տեղեկության) բազմակի պատճենները ստանալու համար:
  4. Նույն ֆերմենտը, որը մաքրեց մարդու ԴՆԹ-ի գենը, օգտագործվում է մանրէային պլազմիդը մաքրելու համար: Հիշեք, որ ԴՆԹ հատվածը, երբ մաքրվում է, առաջացնում է սոսինձային խորհուրդներ, որոնք լրացնում են պլազմին, եթե նույն ֆերմենտով մաքրվում են:
  5. Այնուհետև մաքրված պլազմինը խառնվում է ԴՆԹ բեկորների հետ (պարունակող գեն) և մի ֆերմենտ, որը կոչվում է լիգազ, «սոսնձում» է բեկորները դեպի պլազմիդ ՝ արտադրելով այսպես կոչված պլազմիդ: Recombinant ԴՆԹ. Դա արվել է, վերականգնող ԴՆԹ-ն մտցվում է ընդունող մանրէի մեջ:
  6. Ա հյուրընկալող մանրէներ Այն տեղադրված է ընտրովի սննդանյութերի մեջ, միայն նրանք, ովքեր ունեն rekombinant DNA- ն, դառնում են գաղութներ: Բակտերիաների բազում սերունդներից հետո գեների արտահայտման արտադրանքը, մարդու սպիտակուցները մաքրվում են մանրէներից (դրանք առանձնացված են մանրէային սպիտակուցներից):

Այս մեթոդը արտադրում է մեծ քանակությամբ մարդու սպիտակուցներ `այդպիսով հնարավորություն տալով դրա ուսումնասիրությանը: